电泳是一种生物学上的重要实验技术,常用于进行蛋白质的分离和检测。电泳实验要求操作者严格、精细,下面就是介绍电泳技术的详细步骤:
步骤1:制备凝胶
将凝胶中某些离子的浓度加强,出现网状小孔,样品进入后能够被分离。常用的凝胶有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺-琼脂糖双层凝胶等。
步骤2:制备样品
将待检测的生物样品进行处理,如去除杂质、使样品的PH值、离子浓度、缓冲液适合电泳操作,最终得到一定体积的样品。
步骤3:将样品上样
即将待检样品通过电泳试剂盒中的硬质胶质纸上样带,一次性将样品上样到凝胶的小孔上,并尽可能使样品进入小孔的深处,以确保准确测量。
步骤4:进行电泳试验
将样品所在的凝胶条,小心地置于电泳仪中。电泳仪是根据不同分子电性特性,电力的不同运用达到分离分子的目的,所以电流,电压等参数非常重要。电泳时间和电流应该尽可能地控制在最小值,才能不影响检测结果。
步骤5:染色与检测
将需要检测的凝胶条进行染色处理,染色剂可选用各种各样的荧光剂或金属成像剂,之后检测结果通过照相或者利用电泳仪读取和定量显示。